咨詢電話

18986239998

當前位置:首頁  >  技術文章  >  色譜柱的清洗與再生

色譜柱的清洗與再生

發布時間:2022-04-11      點擊次數:202
色譜柱的使用前后都需經較強的流動相沖洗。通常情況下,在使用硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱時,每次用完后可先用二氯甲烷或正己烷等溶劑低流速長時間的沖洗;鍵合反相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱可先用高比例的水(甲醇水混合溶劑)沖洗,再用100%甲醇沖洗。此外,色譜柱低流速的反相沖洗能夠有效除去堵塞在柱頭或篩板上的雜質,以及清洗聚集在柱頭部位的較強吸附物質。有些色譜柱在許多方法處理污染失效后,反過來使用,不僅柱壓降變小,柱效也可恢復如,延長了色譜柱的使用時間。
 
若上述常規清洗法無法清除污染物,則有必要采用更強的洗脫劑清洗,如反相材料的沖洗順序為:100%甲醇→100%乙腈→乙腈∶異丙醇(75∶25,V/V)→100%異丙醇?;蛘呖梢圆捎幂^低濃度的稀酸或稀堿可將有機溶劑不能洗脫的污染物除去。例如采用0.05mol/L的硫酸和流動相溶液沖洗色譜柱,可取得良好效果;或者采用1%氫氧化銨或50%二甲基甲酰胺水溶液,對聚集在柱頭的污染物具有良好的清洗效果。
 
如果分析時流動相中含有緩沖液(通常為鹽溶液),沖洗時宜用水取代緩沖液與有機相混合沖洗色譜柱(20倍柱體積);再用100%有機溶劑沖洗。若直接用100%有機溶劑沖洗,可造成緩沖液沉積析出,從而損壞柱子品質。同樣的,若流動相中加入酸、堿溶液時,也應當按照上述方法,先采用高比例的水(水:甲醇10:90)沖洗20倍柱體積,防止強酸強堿溶液導致硅膠基質填料的溶解。
 
蛋白質對反相色譜柱的污染已成為常見問題,尤其在分離未經處理的動物組織等生物樣品。一般情況下,純有機溶劑如乙腈或甲醇不能很有效地清洗色譜柱,因而需要一些特殊的清洗方法。首先嘗試用高比例強極性溶劑的流動相進行沖洗,如乙腈∶異丙醇(1:2,V/V);或使用0.1%的三氟乙酸水溶液或者0.1%乙酸水溶液清洗。此外,還可以采用1%十二烷基硫酸鈉 (SDS),然后用5%~95%乙腈/水(含0.1%TFA)梯度沖洗,去除蛋白污染物效果也較好。
 
若采用上述的條件清洗后色譜柱仍不能達到理想的效果,有必要將固定相從色譜柱內取出,進行清洗再生后重新裝填。具體操作是:將色譜固定相從色譜柱內打出后,用甲醇浮選,去除其中細小的破碎顆粒;然后用二甲基甲酰胺、丙酮、甲醇超聲清洗;最后干燥固定相,重新裝填色譜柱。經該方法處理的色譜柱,性能可得到顯著提高。
 
 
版權所有©2022 湖北捷島科學儀器有限公司 All Rights Reserved    備案號:鄂ICP備15007341號-1    sitemap.xml    管理登陸    技術支持:化工儀器網    
国产精品免费第一区三,国产精品免费福利电影网,国产精品免费高清在线观看,国产精品免费观在线,国产精品免费精品一区 <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链>
掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站
訪問手機站